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    早上,花草树枝在露水的滋润下,显得精神焕发,散发出阵阵清香。小鸟在枝

浅谈目前新冠病毒的检测方法

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当前批准上市的新冠肺炎检测试剂主要包括两类,一类是核酸检测试剂,一类是抗体检测试剂。随着对疾病的认识和研发工作的进展,将来还会有更多的检测试剂和方法投入使用。

 

第一类的核酸检测过程包括标本处理、核酸提取、进行PCR检测等多个步骤,平均检测时间需要2-3个小时。由于它是直接对我们采集标本中的病毒核酸进行检测,特异性强,敏感度相对较高,是当前主要的检测手段。

                                          

 

第二种抗体检测,包括胶体金法磁微粒化学发光法其中胶体金法平均检测时间15分钟左右,磁微粒化学发光法一般需要30—60分钟。抗体检测是对人体血液中的抗体水平进行检测,在疾病的感染早期,人体内可能还没有产生抗体,所以它存在检测的窗口期。因此,抗体检测可用于对核酸检测阴性的病例进行辅助诊断,也可以对病例进行排查筛查,但是还不能代替核酸检测方法。

 

 

 

接下来就为大家详细阐述新冠基因核酸测试法,即RT-PCR法

 
 

 

1、 与常规PCR反应相比,试剂中要增加荧光试剂,插入DNA片段中,用于定量检测。

 

2、 PCR,扩增新冠病毒的目标DNA片段。

 

3、 Ct值,即PCR扩增循环数目,当初始病毒DNA浓度较高时,达到某一荧光强度的循环数目越少。

  

 

4、 检测设备和试剂:B2型生物安全柜,RT-PCR仪,超纯水机,核酸检测试剂盒。

 

参照2020版中国药典3407 外源性DNA残留量测定法,实验用水应使用超纯水,否则可能由于实验用水中含有有机物、酶、离子等造成实验失败或污染,如下表所示。

 

问题

可能原因

无模板对照中有信号存在,且或熔解曲线图中出现多个峰

模板或试剂被核酸(DNA、 cDNA) 污染。

存 在 引 物二聚体或其它特殊结构。

定量 PCR 图或凝胶上无明显的 PCR 产物

模板中含有抑制剂、核酸酶或蛋白酶,或模板已被降解。

PCR 效率超过 110%

模板中含有抑制剂、核酸酶或蛋白酶,或模板已被降解。

 

分析实验室用水建议

实验室

实验项目

水质要求

理化室

仪器分析

一级超纯水(终端精制器)

常规理化实验

三级纯水

试剂配制

三级纯水

器具精洗

三级纯水

微生物室

培养基配制

三级纯水

分子生物学实验

一级超纯水

Elisa实验(配液,洗板)

级超纯水

动物实验室

清洁级动物饮用水

无菌水(终端精制器)

 

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讲座主题

制药企业实验室用水要求

 

 
 
 
 

 

东锐代理默克纯水机:Milli-Q IQ 70XX一体机、Milli-Q IQ 7000超纯水机、Milli-Q IX 70XX纯水机、Milli-Q Direct一体机、Milli-Q Reference超纯水机等。

 

如需了解详情,欢迎咨询东锐科技产品经理

 

黄经理

电话:13822254232
邮箱:jiale.huang@dr-tech.com.cn

 

             

 

当前批准上市的新冠肺炎检测试剂主要包括两类,一类是核酸检测试剂,一类是抗体检测试剂。随着对疾病的认识和研发工作的进展,将来还会有更多的检测试剂和方法投入使用。

 

第一类的核酸检测过程包括标本处理、核酸提取、进行PCR检测等多个步骤,平均检测时间需要2-3个小时。由于它是直接对我们采集标本中的病毒核酸进行检测,特异性强,敏感度相对较高,是当前主要的检测手段。

                                          

 

第二种抗体检测,包括胶体金法磁微粒化学发光法其中胶体金法平均检测时间15分钟左右,磁微粒化学发光法一般需要30—60分钟。抗体检测是对人体血液中的抗体水平进行检测,在疾病的感染早期,人体内可能还没有产生抗体,所以它存在检测的窗口期。因此,抗体检测可用于对核酸检测阴性的病例进行辅助诊断,也可以对病例进行排查筛查,但是还不能代替核酸检测方法。

 

 

 

接下来就为大家详细阐述新冠基因核酸测试法,即RT-PCR法

 
 

 

1、 与常规PCR反应相比,试剂中要增加荧光试剂,插入DNA片段中,用于定量检测。

 

2、 PCR,扩增新冠病毒的目标DNA片段。

 

3、 Ct值,即PCR扩增循环数目,当初始病毒DNA浓度较高时,达到某一荧光强度的循环数目越少。

  

 

4、 检测设备和试剂:B2型生物安全柜,RT-PCR仪,超纯水机,核酸检测试剂盒。

 

参照2020版中国药典3407 外源性DNA残留量测定法,实验用水应使用超纯水,否则可能由于实验用水中含有有机物、酶、离子等造成实验失败或污染,如下表所示。

 

问题

可能原因

无模板对照中有信号存在,且或熔解曲线图中出现多个峰

模板或试剂被核酸(DNA、 cDNA) 污染。

存 在 引 物二聚体或其它特殊结构。

定量 PCR 图或凝胶上无明显的 PCR 产物

模板中含有抑制剂、核酸酶或蛋白酶,或模板已被降解。

PCR 效率超过 110%

模板中含有抑制剂、核酸酶或蛋白酶,或模板已被降解。

 

分析实验室用水建议

实验室

实验项目

水质要求

理化室

仪器分析

一级超纯水(终端精制器)

常规理化实验

三级纯水

试剂配制

三级纯水

器具精洗

三级纯水

微生物室

培养基配制

三级纯水

分子生物学实验

一级超纯水

Elisa实验(配液,洗板)

级超纯水

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