黑科技---即时出结果的浮游菌、粒子计数二合一技术

发布时间：2018-10-19 浏览次数： 加载中...

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一、传统的空气微生物检测方法流程如下：

1）预制平板先预培养2-3天

2）浮游菌采样10min到平板上，在线式采样每4小时内连续更换平板

3）平板再培养3-5天

4）平板菌落计数出结果

特点：工作量大、耗时长、操作繁琐、结果滞后、配套仪器多，对A级连续采样、换平板等操作易对样品或环境造成二次污染，不利于在线检测。

二、环境中尘埃粒子检测方法流程如下：

1）在粒子计数器上设好程序

2）采样结束即出结果并打印出数据，用时10min

特点：省事省时省设备省空间省人又省钱，不要太完美。

如用激光粒子计数器去检测微生物？浮游菌、粒子计数二合一，即时出结果；想想都激动。

今天给大家介绍一个黑科技：激光诱导荧光技术 (LIF)。如果你是理工男（女）请顺着看，如果不是那就直接看后面结果。

什么是激光诱导荧光技术呢？

所有应用于片状光源的照明，对被测对象（原子、分子或者原子基团、自由基等）所发出的，由这种片状光源所激发（诱导）的荧光信号进行探测性的技术都可以称为激光诱导荧光(LIF)。由于这种荧光信号的强弱及激发光的强度，激发光的波长，被测组分的浓度（密度）直接相关，因此可用二维成像测量元件测量这些荧光信号的图像，根据图像，分析测量相关的物理参数。

那么什么是荧光呢？

被激发光照射的粒子（分子或者原子）吸收光子后，由基态跃迁至激发态，激发态的粒子不是稳定的，通过各种方式释放能量，返回基态。处于激发态的粒子可通过自发辐射，回迁到基态，如果自发辐射与受激吸收的时间间隔仅在微量级，则由此发射的光成为荧光。

常规激光粒子计数器的工作原理是一个激光二极管生成窄的激光束，激光束聚焦并且成线以便于所有的采样气体能够通过激光束中心。当粒子通过光束时，光与它相互作用，散射和反射光在光检测器上反映。检测器收集光源并将它转换成一个电流值。然后电路由接受的电流生成一个电压脉冲，再转换成相应的数值。和光学粒子计数一样，LIF也使用激光。为了确定空气传播的粒子是否是微生物，LIF利用了微生物含有相对高浓度荧光分子这一特征。因此，当激光照射到微生物上时，光不仅是散射的，而且一些光被吸收并以更高的波长重新发射。如图1所示，荧光强度是LIF识别活粒子的关键特征。

当微生物进入LIF光学室时，它会通过蓝色激光器的光束。如图1所示，在右边出现了两种不同的光学现象。一些激光被荧光分子吸收，以更高的波长重新发射，一些光散射。散射光和荧光光都经过聚焦和过滤，然后才被检测到它们的强度。强度数据用来确定粒子的活性。

如何收集这些数据以及如何使用这些数据来区分，不同仪器制造商是不同的。例如，在TSI公司的BioTrak实时微生物粒子计数器模型9510-BD中，对每个粒子测量了三种不同的光强度;散射光强，荧光光强430 - 500 nm，荧光光强500-650 nm(激发发生在405 nm)。采用一种专用算法对这三个参数进行处理，并进行了可行性分析。该算法是通过对大量微生物和惰性粒子的测量得出的。图2显示了测量多个光学参数进行鉴别的值。图A显示了花粉和细菌对2个参数的分辨能力较差，图B显示了3个光学参数(通过BioTrak模型9510-BD测量)，提供了对普通(细菌)和非(花粉)颗粒的分辨能力。